Aktuellt om malaria-diagnostik

PCR-analys för diagnostik av malaria

Analys av tjock droppe och blodutstryk är fortfarande ”golden standard” vid misstanke om malaria. Under senare år har olika snabbtester för diagnostik av framför allt P. falciparum – malaria kommit i bruk och utgör ett värdefullt komplement i vissa situationer. Därutöver erbjuder Karolinska Universitetslaboratoriet Solna, Klinisk mikrobiologi, Parasitlab, 171 76 Stockholm, PCR- analys för malaria av alla fyra species. Metoden uppvisar ca 10 ggr högre sensitivitet jämfört med ljusmikroskopi och en högre specificitet.

Indikation för PCR-analys är:

- svårigheter med speciesdifferentiering vid ljusmikroskopi

- misstanke om dubbelinfektion

- stark klinisk misstanke men analys av tjock droppe och blodutstryk utfallit negativt vid upprepad provtagning

PCR – analys lämpar sig ej att användas vid kontroll efter insatt behandling.

Analysen är både arbets-och tidskrävande och svar erhålles tidigast dagen efter provets ankomst till laboratoriet (blod tages i EDTA-rör).

Kvalitetssäkrad ljusmikroskopisk diagnostik av malaria

Referensgruppen i parasitologi rekommenderar starkt alla laboratorier i Sverige som utför malaria-diagnostik att deltaga i någon form av extern kvalitetsutvärdering. UK-NEQAS är en brittisk sådan organisation som flera laboratorier i Sverige har god erfarenhet av. Kontakta EQUALIS, Box 977, 751 09 Uppsala, tel: 018- 69 31 45, fax: 018- 69 31 46, för ett erhålla mer information (UK-NEQAS kontaktorgan i Sverige).

Räkneokular för bedömning av antalet parasiter vid malaria

Det är mycket viktigt att korrekt bestämma parasitemi-graden vid P. falciparum- malaria.

Graden av parasitemi har stor betydelse vid den kliniska handläggningen av svår malaria samt

vid misstanke om resistens hos parasiterna mot de olika malaria-läkemedlen.

I referenslitteratur finns flera metoder angivna för att bestämma parasitemi-graden.

Referensgruppen för parasitologi vill dock härmed uppmana landets parasitologiska laboratorier att använda den av Smittskyddinstitutets (SMI) parasitologiska avdelning rekommenderade metoden, nämligen räkning av antalet malaria-infekterade erytrocyter i tunt blodutstryk med sk räkneokular, (se nedan). Kontakta vid behov SMIs parasitologiska avdelning för ytterligare information, tel 08- 457 23 00.

För Svenska Läkaresällskapets referensgrupp för parasitologi

Stockholm den 14 januari 2003

Ulf Bronner

Överläkare

Infektionskliniken

Karolinska sjukhuset

______________________________________________

Räkning av antalet malaria-infekterade

erytrocyter i tunt utstryk.

Apparatur

Mikroskop med räkneokular, s k retikulocyt-okular

Arbetsprocedur

1. Välj ett område i ett Giemsa-färgat tunt utstryk där erytrocyterna ligger jämnt fördelade.

2. Räkna alla erytrocyter inuti lilla rutan plus två kanter.

3. Räkna samtidigt antalet infekterade erytrocyter i den stora rutan plus två kanter. Ta även med lilla rutan.

4. Fortsätt i preparatet enligt punkt 2 och 3 tills 100 erytrocyter i lilla rutan är räknade. Då är 1000 erytrocyter granskade med avseende på parasiter.

Upprepa minst tre gånger och räkna ut medelvärdet (=A)

5. Uträkning: A x 0,1 = % infekterade erytrocyter.

OBS. Om en erytrocyt innehåller två eller flera plasmodier räknas den fortfarande som en infekterad erytrocyt.

Utsvar: x % erytrocyter infekterade med plasmodier.

Alla parasitemier utsvaras med en (1) decimal.

030114

Marianne Lebbad

Avd. för parasitologi, mykologi och vatten

Smittskyddsinstitutet

_______________________________________________________________________